一文读懂中空纤维膜的常规使用工艺（续集2）

3、目的产物浓缩及洗滤

目的产物的超滤浓缩于细胞收获过程类似，需要的大分子被截留在回流液中，随着滤液被去除，浓度增加，如以新的缓冲液置换去除的滤液，即为洗滤。

影响目的产物浓缩及洗滤的因素很多，包括产物大小、形态、可溶性、剪切敏感性，起始料液的浓度、粘度、PH、所需达到的终浓度，处理时间等，需根据具体应用状态进行测试。

实际操作时，膜孔径的正确选择是浓缩及洗滤工艺成功的关键，一般推荐膜截留分子量为目的产物的1/5~1/3，如处理分子量为160KD的lgG，可选用30KD或50KD的组件，而处理分子量66KD的白蛋白，可选用10KD或30KD的组件，膜孔径过大，可能造成产物损失，过小，则会降低通量，延长处理时间。另一个影响浓缩的因素是料液的粘度，对于高粘度料液，需对通量、切向流速及TMP等参数进行更多的调节，以避免形成凝胶层。此外，高倍浓缩可能造成后续处理困难，如形成膜浓差计划或蛋白质沉淀。所以在涉及浓缩和洗滤的工艺中，一般分布进行，即先浓缩至一定体积，然后洗滤换液至目标缓冲液体积，最后再进行终浓缩。

洗滤是缓冲液置换的过程，同时也可进一步去除小分子杂质，洗滤的程度一般以洗滤体积衡量，即所用洗滤缓冲液的体积与起始料液体积的比值。洗滤包括三种不同模式：连续洗滤是指缓冲液的补加速率与滤液去除的速率相等，即进样料液体积恒定；不连续洗滤实际上是反复浓缩和稀释的过程，其处理效率是要低于连续洗滤；而当料液现有缓冲体系与目标缓冲液体系不相容，可能导致产物损坏时，需要使用顺序洗滤，即以不同成分的缓冲液先后进行洗滤，并最终形成目标体系。

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